Implementación de la tecnología fertilización in vitro para la producción de embriones bovinos.

Resumen

Las principales ventajas de la producción de embriones bovinos por fertilización in vitro (FIV) son la evaluación y el uso eficiente de espermatozoides y ovocitos, la prolongación de la vida reproductiva de animales genéticamente valiosos, la determinación y selección del sexo de embriones y el control de enfermedades reproductivas, entre otras. Si bien la FIV ya está siendo utilizada en distintas regiones de latinoamérica, es importante señalar que se presentan una serie de dificultades a la hora de implementar la técnica en el laboratorio. De allí surge uno de los objetivos de este proyecto, el cual es estandarizar y validar la técnica de FIV, a partir de ovocitos recolectados de ovarios obtenidos de frigorífico. Para llevar a cabo este proyecto, se obtuvieron ovarios de vacas en edad reproductiva faenadas en frigoríficos de la zona. Los complejos cúmulus-ovocito (COCs) se obtuvieron por punción de folículos de tamaño intermedio (2-8 mm). Posteriormente se realizó la recuperación de los COCs, los cuales fueron visualizados bajo lupa y seleccionados según estándares de calidad para continuar con su maduración por 16 horas en una atmósfera de 6% CO2 y 100% de humedad a 38,5°C. Se descongelaron pajuelas de semen de 0,5 ml en un baño térmico a 37°C durante 60 segundos y se lavaron los espermatozoides utilizando un medio comercial de activación. Se realizó conteo y dilución para obtener la dosis inseminante de 16 x 106 espermatozoides/ml. Las gametas se co-incubaron durante 4 horas en una atmósfera de 6% CO2 y 100% de humedad a 38,5°C. Posteriormente se realizó la remoción de las células del cúmulus y se evaluó la maduración. Los supuestos cigotos se cultivaron en medio adecuado en estufa gaseada al 6 % de CO2 en aire humidificado a 38,5°C. El clivaje se evaluó el día 2 y el desarrollo se observó cada 24 horas hasta el día 7. En las experiencias realizadas hasta el momento, se pudo observar alto porcentaje de clivaje pero solo un bajo porcentaje llegó a mórulas día 3/ 4. Se espera que en próximos ensayos se pueda lograr la perpetuidad y la evolución de los mismos. A través de la implementación de estas técnicas en la Facultad de Ciencias Veterinarias, se espera obtener las herramientas para ofrecer a futuro los beneficios productivos que la FIV brinda no solo para la especie bovina sino también para otras especies de interés en la zona, en las cuales aún existen problemas a resolver.