Esta obra se publica bajo licencia Creative Commons 4.0 Internacional. (Atribución-No
Comercial-Compartir Igual) a menos que se indique lo contrario, http://www.creativecommons.org.ar/licencias.htmlDOI: http://dx.doi.org/10.19137/cienvet-202022105
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Comercial-Compartir Igual) a menos que se indique lo contrario, http://www.creativecommons.org.ar/licencias.html
COMUNICACIONES
Acción de extracto de Polygonum hidropiperoides sobre componentes celulares y tisulares en heridas cutáneas en ratones. Estudio Preliminar
Polygonum hydropiperoides extract action on cellular and tissue components in skin wounds in mice. Preliminary Study.
Ação de extrato de Polygonum hidropiperoides sobre componentes
celulares e tecidulares em feridas cutâneas em ratos. Estudo
Preliminar
García MG1, Salas C1,2, Erviti P 1,2, Toribio M3, Lacolla D1
1 Cátedra de Histología. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad Nacional de La
Pampa. Calle 5 esq. 116. General Pico, La Pampa. Argentina. (6360)
2 Becario de iniciación en la investigación. Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad
Nacional de La Pampa.
3 Cátedra de Farmacología. Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Pampa.
Correo electrónico: dlacolla@hotmail.com
Polygonum hidropiperoides (lagunilla) es una planta perenne de la familia Polygonaceae. Las especies del género Polygonum son cultivadas y comercializadas con fines medicinales y en el medio rural son usadas en los animales como cicatrizante. Se analizó la acción de los extractos de sus partes aéreas sobre componentes celulares y tisulares en heridas netas provocadas en ratones. Las lesiones provocadas fueron tratadas tópicamente durante 10 días con extractos diluidos de la especie nombrada obteniéndose muestras diarias para realizar estudios histológicos. En forma paralela, y para poder comparar la evolución de las heridas, se procedió en forma similar con ratones que no fueron tratados. Se observaron diferencias significativas en el arribo y presencia de neutrófilos y en la aparición de fibroblastos (prueba t de Student para dos muestras independientes). Entre otros cambios tisulares se destacó también el aumento de la vascularización.
Palabras clave: Polygonum; Heridas; Piel; Extractos vegetales; Cicatrización
Polygonum hydropiperoides (swamp smartweed) is a perennial plant of the Polygonaceae family. The species of the genus Polygonum are cultivated and marketed for medicinal purposes, and in the rural area, they are used in animals as a healing. The action of the extracts of their aerial parts was analyzed on cellular and tissue components in incision wounds caused in mice. The lesions caused were treated topically for ten days with diluted extracts of the named species, obtaining daily samples to perform histological studies. At the same time, and to be able to compare the evolution of the wounds, a similar procedure was performed with mice that were not treated. Significant differences were observed in the arrival and presence of neutrophils and in the appearance of fibroblasts (Student t-test for two independent samples). Among other tissue changes, the increase in vascularity was also highlighted.
Key words: Polygonun; Wounds; Skin; Plant extracts; Healing
Al producirse una herida en la piel se desarrollan acciones de muchos tipos celulares y componentes intercelulares cuyo fin es la reparación o cicatrización de la misma(1). La utilización de sustancias naturales en el tratamiento de diferentes alteraciones, como es el caso de las heridas cutáneas, data de miles de años(2,3) constituyendo en la actualidad un desafío la exploración de nuevas fuentes. El reino vegetal ofrece numerosas sustancias potencialmente útiles para la medicina. Polygonum hidropiperoides está citada entre las especies adaptadas al suelo pampeano(4,5,3) que tiene, entre otros, supuestos efectos cicatrizantes aunque no está especificada su forma de uso(6-8). Es una planta perenne de 40 a 90 cm de alto, con inflorescencia formada por racimos delgados blancos o rosados que frecuentemente se la encuentra en charcas, lagunas y arroyos, se la conoce con el nombre vulgar de “lagunilla” y pertenece a la familia Polygonaceae. Se demostró también que posee actividad antimicrobiana in vitro y atoxicidad en ratones(9). Se trabajó en un modelo histológico que permitió valorar la acción de principios activos de Polygonum hidropiperoides presentes en distintos componentes celulares y tisulares luego de producida una herida(10-13) Se tuvieron en cuenta, para evaluar la actividad biológica, el arribo y permanencia de neutrófilos, característicos de las etapas iniciales de los procesos de reparación, y la llegada y permanencia de fibroblastos, la vascularización y ordenamiento de fibras colágenas, como elementos que se producen en una segunda instancia (14, 15,13).
Se recolectaron partes aéreas de Polygonum hidropiperoides en floración procediéndose posteriormente a su secado. Luego fueron maceradas para obtener extractos hidroalcohólicos que se llevaron a sequedad y se fraccionaron en frasco ampolla. Se conservaron a -20 grados centígrados(16,17). Al momento de realizar la prueba se tomaron 2gr de extracto seco y se diluyeron en 50 cc de agua destilada. Modelo experimental propuesto: los ratones fueron anestesiados y depilados en el área dorsal, donde se realizó una herida neta a 0.5 cm a la derecha de la línea media. Las heridas se trataron, en forma tópica, con extractos diluidos de vegetales de las plantas mencionadas, a razón de 4 gotas diarias, en dos aplicaciones separadas de 12 horas. Se trabajó con dos grupos: uno control (GC) y uno tratado (GT). La aplicación de las sustancias de prueba se realizó dos veces al día durante 10 días. Se observó diariamente la evolución de las heridas en los dos grupos y se obtuvieron muestras para realizar los correspondientes estudios histológicos (13,18,15). Para ello se removió el tejido y se procesó según técnicas de rutina. (Fotos Nº 1 y Nº 2). Los parámetros observados fueron, la migración celular en general, el arribo de neutrófilos, el desplazamiento y proliferación de las células epiteliales, la invasión de fibroblastos y macrófagos, el ordenamiento de fibras colágenas y la neovascularización. A los efectos de comprobar significación en los individuos con respecto a los que no reciben los tratamientos, se utilizó la prueba t de Student para dos muestras independientes.
Se observaron diferencias significativas en el arribo y presencia de neutrófilos y en los fibroblastos con respecto a los grupos control. En los ratones del grupo GC se observó, a ojo desnudo, la recuperación de la integridad epidérmica de la herida a partir del día 8. El número de neutrófilos en la zona periférica a la herida en este grupo fue superior a los 45 por campo microscópico, disminuyendo paulatinamente hasta estabilizar su número en 1 ó 2 por campo a partir del día 4 (Tabla Nº 1).
Tabla Nº1. Cantidad de neutrófilos por campo microscópico
Cantidad de neutrófilos por campo microscópico observados en los 1, 2, 3, 4 y 5
días posteriores a realizadas las heridas en los grupos GC (ratones no tratados)
y GT (ratones tratados con extracto de Polygonum hidropiperoides) * p<0.05.
(Fuente propia)
En el GT a partir del día 7 se observó a simple vista la integridad de la epidermis. Durante los tres primeros días se observaron diferencias significativas con respecto al grupo control apreciándose en este período mayor número de neutrófilos. Los fibroblastos incrementaron su número a partir del día 4 llegando el día 10 a un máximo de 44 por campo, para luego ir disminuyendo. Durante ese período se observaron diferencias significativas con respecto al GC (Tabla Nº 2).
Tabla Nº2. Cantidad de fibroblastos por campo microscópico.
Cantidad de fibroblastos por campo microscópico observados en los 4, 5, 6,
8 y 10 días posteriores a realizadas las heridas en los grupos GC (ratones no
tratados) y GT (ratones tratados con extracto de Polygonum hidropiperoides)*
p<0.05. (Fuente propia)
Típicos fibroblastos estrellados aparecieron tempranamente (Foto
Nº 3) indicando actividad regenerativa en la dermis.
No se observaron diferencias significativas con respecto a las variaciones
sufridas en el espesor de la epidermis.
La vascularización fue muy importante con Poligonum (Foto Nº 4)
durante los días 4 y 5. A las dosis utilizadas, se apreció una gran reacción
tisular durante los primeros días del ensayo, y un acortamiento
en el tiempo de restablecimiento respecto al grupo control. Los ratones
del grupo tratado mejoraron el proceso de curación de la herida
evidenciado por el mayor número de neutrófilos, fundamentalmente
durante las primeras 72 horas de realizada la incisión. Los fibroblastos
aparecieron en un mayor número a partir del día 4, disminuyendo luego
del día 10 lo que indica un avanzado proceso de curación.
Se concluye que a la dilución y dosis utilizada (2 gr en 50 cc de agua
destilada, 4 gotas diarias) y en las condiciones experimentales de este
ensayo, Polygonum hidropiperoides estimula los procesos de curación
de la herida (Foto Nº 5).
Agradecemos a la Bibl. Sofía Lacolla por la traducción del resumen.
1. Kumar V, Abbas A, Fausto N. Robins y Cotran: Patología estructural y funcional. 7ma. Edición. Ed. Elseiver. Madrid. España.2005.
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15. Ross y Pawlina Histología Texto y atlas color con biología celular. Editorial Panamericana. Buenos Aires.2004.
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17. Steibel P, Toso R, Troiani H. Plantas Medicinales de la región pampeana. Laboratorio Lafitar SRL.2008.
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Fecha de recepción de artículo original: 24-10-2019
Fecha de aceptación para su publicación: 10-12-2019